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背景:骨关节炎(Osteoarthritis,OA)的发生与软骨细胞自噬活动降低、细胞稳态失衡密切相关.雷帕霉素是一种常用的自噬诱导剂,能上调自噬活动、维持细胞稳态.目的:明确能否通过雷帕霉素提高软骨细胞自噬相关因子的表达,促进软骨细胞生存.方法:收集正常软骨标本5例,中期及晚期OA软骨标本各10例.免疫组织化学检测软骨组织中自噬相关蛋白表达情况.体外分离、培养软骨细胞,进行药物实验.各期OA标本软骨细胞分为低、中、高浓度实验组和对照组,分别予以1μmol/L、5μmol/L、10μmol/L雷帕霉素及相同体积培养基.运用聚合酶链式反应(poly-merase chain reaction,PCR)及Western-Blot检测自噬相关因子ULK1、Beclin1、LC3表达变化规律.结果:免疫组织化学检测发现,随着OA退变程度加重,软骨组织中自噬相关蛋白阳性表达率逐渐降低.PCR及Western-Blot发现,雷帕霉素干预正常软骨细胞后,实验组自噬相关因子ULK1、Beclin1、LC3表达量高于对照组,且与雷帕霉素呈浓度依赖性.中期OA软骨细胞结果与正常软骨细胞类似,但组间差异更明显.晚期OA软骨细胞中,实验组自噬相关因子表达量较对照组呈上升趋势,但升高幅度较小.结论:雷帕霉素可以上调自噬相关因子的表达,其中正常及中期OA软骨细胞对雷帕霉素诱导的自噬活动具有良好的反应性,而

作者:王浩;曹飞;斯海波;沈彬

来源:中华骨与关节外科杂志 2017 年 10卷 3期

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作者:
王浩;曹飞;斯海波;沈彬
来源:
中华骨与关节外科杂志 2017 年 10卷 3期
标签:
骨关节炎 自噬 mTOR信号通路 雷帕霉素 Osteoarthritis Autophagy mTOR Signaling Pathway Rapamycin
背景:骨关节炎(Osteoarthritis,OA)的发生与软骨细胞自噬活动降低、细胞稳态失衡密切相关.雷帕霉素是一种常用的自噬诱导剂,能上调自噬活动、维持细胞稳态.目的:明确能否通过雷帕霉素提高软骨细胞自噬相关因子的表达,促进软骨细胞生存.方法:收集正常软骨标本5例,中期及晚期OA软骨标本各10例.免疫组织化学检测软骨组织中自噬相关蛋白表达情况.体外分离、培养软骨细胞,进行药物实验.各期OA标本软骨细胞分为低、中、高浓度实验组和对照组,分别予以1μmol/L、5μmol/L、10μmol/L雷帕霉素及相同体积培养基.运用聚合酶链式反应(poly-merase chain reaction,PCR)及Western-Blot检测自噬相关因子ULK1、Beclin1、LC3表达变化规律.结果:免疫组织化学检测发现,随着OA退变程度加重,软骨组织中自噬相关蛋白阳性表达率逐渐降低.PCR及Western-Blot发现,雷帕霉素干预正常软骨细胞后,实验组自噬相关因子ULK1、Beclin1、LC3表达量高于对照组,且与雷帕霉素呈浓度依赖性.中期OA软骨细胞结果与正常软骨细胞类似,但组间差异更明显.晚期OA软骨细胞中,实验组自噬相关因子表达量较对照组呈上升趋势,但升高幅度较小.结论:雷帕霉素可以上调自噬相关因子的表达,其中正常及中期OA软骨细胞对雷帕霉素诱导的自噬活动具有良好的反应性,而