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目的 研究人类非肌肉型肌球蛋白重链9(M Y H9)对人食管癌细胞系EC109发生上皮间质转化(EM T)及其肿瘤干细胞特性的影响.方法 通过 MYH9小干扰 RNA 转染 EC109细胞,设置阴性对照组(NC)和转染组(si-MYH9).采用RT-PCR、Western blot及免疫荧光技术检测转染后EC109细胞中MYH9蛋白、EMT表型蛋白(E-cad、ZO-1、Vimentin)及肿瘤干细胞标志蛋白(CD133、CD44、ALDH1、Lgr5)的表达,利用细胞增殖实验(CCK8)及 Transwell实验分别检测MYH9沉默对细胞增殖及迁移能力的影响,借助细胞成球培养检测MYH9沉默对细胞成球能力的影响.结果 si-M Y H9可明显沉默EC109细胞中M Y H9蛋白的表达(P<0.05).沉默M Y H9蛋白表达可显著抑制 EC109细胞增殖及迁移能力(均 P<0.05),同时伴有上皮表型蛋白E-cad及ZO-1表达升高(均 P<0.05),间质表型蛋白Vim-entin表达降低(P<0.05);沉默M Y H9蛋白表达还可抑制EC109形成细胞球,同时伴有肿瘤干细胞标志蛋白(CD133、CD44、ALDH1、Lgr5)的表达降低(均 P<0.05).结论 沉默MYH9蛋白表达可抑制食管癌细胞的增殖及迁移能力,抑制细胞发生EM T转化,减弱食管癌细胞的肿瘤干细胞特性.

作者:古琳;王建军;陈开林;王思桦;王勇

来源:华中科技大学学报(医学版) 2018 年 47卷 1期

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作者:
古琳;王建军;陈开林;王思桦;王勇
来源:
华中科技大学学报(医学版) 2018 年 47卷 1期
标签:
MYH9 食管癌 上皮间质转化 肿瘤干细胞 MYH9 esophageal cancer epithelial-mesenchymal transition cancer stem cell
目的 研究人类非肌肉型肌球蛋白重链9(M Y H9)对人食管癌细胞系EC109发生上皮间质转化(EM T)及其肿瘤干细胞特性的影响.方法 通过 MYH9小干扰 RNA 转染 EC109细胞,设置阴性对照组(NC)和转染组(si-MYH9).采用RT-PCR、Western blot及免疫荧光技术检测转染后EC109细胞中MYH9蛋白、EMT表型蛋白(E-cad、ZO-1、Vimentin)及肿瘤干细胞标志蛋白(CD133、CD44、ALDH1、Lgr5)的表达,利用细胞增殖实验(CCK8)及 Transwell实验分别检测MYH9沉默对细胞增殖及迁移能力的影响,借助细胞成球培养检测MYH9沉默对细胞成球能力的影响.结果 si-M Y H9可明显沉默EC109细胞中M Y H9蛋白的表达(P<0.05).沉默M Y H9蛋白表达可显著抑制 EC109细胞增殖及迁移能力(均 P<0.05),同时伴有上皮表型蛋白E-cad及ZO-1表达升高(均 P<0.05),间质表型蛋白Vim-entin表达降低(P<0.05);沉默M Y H9蛋白表达还可抑制EC109形成细胞球,同时伴有肿瘤干细胞标志蛋白(CD133、CD44、ALDH1、Lgr5)的表达降低(均 P<0.05).结论 沉默MYH9蛋白表达可抑制食管癌细胞的增殖及迁移能力,抑制细胞发生EM T转化,减弱食管癌细胞的肿瘤干细胞特性.