目的 无血清悬浮培养人结肠癌DLD-1细胞形成细胞球,检测其肿瘤干细胞标志表达变化,并探讨球细胞发生上皮间质转化与肿瘤干细胞及肿瘤恶性行为之间的联系.方法 在添加生长因子的无血清培养基中培养DLD-1细胞形成球细胞,运用Transwell实验检测细胞的迁移、侵袭能力变化；裸鼠皮下成瘤和软琼脂克隆形成实验分别检测体内外成瘤能力变化；流式细胞术检测细胞中CD133表达变化；实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR),Western blot检测CD133、CD166、富含亮氨酸重复序列G-蛋白偶联受体5(Lgr5)及上皮间质转化关键基因表达变化.结果 球细胞中CD133+细胞明显增加[(0.90±0.03)％比(2.70±0.35)％,P ＜0.05]；高表达肿瘤干细胞标志CD133、CD166、Lgr5和间质分子波形蛋白(Vimentin)及Snail而低表达上皮细胞标志ZO-1(P＜0.05).球细胞的转移、侵袭、体内外成瘤能力明显增加(P＜0.05).结论 虽然黏钙蛋白(E-cadherin)表达明显升高,但是结合体内外实验结果,我们认为:E-cadherin可能不是介导细胞恶性行为的独立因素,悬浮培养形成的结肠癌球细胞已发生上皮间质转化,表现出肿瘤干细胞的特征.
作者：冷政伟；尹碧辉；李勇；谭俊；岳中屹；陈锦皇；奚海林；陶凯雄；夏清华
来源：中华实验外科杂志 2013 年 30卷 3期
