目的:构建以人抗乙肝表面抗原(HBsAg)单链抗体(ScFv)为导向作用,白细胞介素2(IL 2)为治疗作用的融合蛋白原核表达载体pQE 40/ScFv IL-2.方法:应用PCR技术将抗HBsAg单链抗体与白细胞介素2在分子水平上进行基因重组,构建中间载体pGEM7Zf(+)/ScFv-IL-2,经酶切鉴定及序列测定正确后,将目的基因片段克隆到pQE 40表达载体中,转化大肠杆菌,经IPTG诱导表达.结果:SDS-PAGE结果显示在相对分子质量约4.3×104Da处,可见蛋白表达带.以鼠抗人IL-2单克隆抗体经免疫印迹验证,该表达蛋白为所设计的融合蛋白.结论:融合蛋白ScFv-IL-2的成功构建及表达,为融合蛋白的纯化和研究开发新型的乙肝导向治疗的基因工程药物打下良好的基础.
作者:陈文吟;粟宽源;任向荣;唐永红;郑业华;余宙耀
来源:天津医药 2002 年 30卷 8期