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目的:探讨转染反义脱氧寡核苷酸(AODN)对血管平滑肌细胞(VSMCs)碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)基因表达的影响机制.方法:使用原位杂交和免疫组化技术检测体外培养的VSMCs中bFGF mRNA和蛋白表达;利用脂质体分别将设计合成浓度为5 μmol/L反义(反义组)、正义(正义组)及随机(随机组)脱氧寡核苷酸导入体外培养的VSMCs;应用逆转录PCR和Western Blot半定量测定及计算机图像分析的方法,观测寡核苷酸对bFGF基因表达的影响.结果:体外培养的大鼠VSMCs均有bFGF mRNA和蛋白表达,反义bFGF寡核苷酸作用于VSMCs后1~5 d,bFGF mRNA表达和蛋白表达均明显减弱,反义组与对照组比较,mRNA、蛋白表达在第1~5 d表达差异均有统计学意义;而正义、随机组无此效应,与单纯脂质体和空白对照组相比差异无统计学意义(P>0.05).结论:反义bFGF寡核苷酸对血管平滑肌细胞bFGF基因表达的抑制作用具有序列特异性.

作者:孙晋津;陈剑秋

来源:天津医药 2006 年 34卷 4期

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作者:
孙晋津;陈剑秋
来源:
天津医药 2006 年 34卷 4期
标签:
寡核苷酸类,反义 成纤维细胞生长因子2 肌细胞,平滑肌 基因表达
目的:探讨转染反义脱氧寡核苷酸(AODN)对血管平滑肌细胞(VSMCs)碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)基因表达的影响机制.方法:使用原位杂交和免疫组化技术检测体外培养的VSMCs中bFGF mRNA和蛋白表达;利用脂质体分别将设计合成浓度为5 μmol/L反义(反义组)、正义(正义组)及随机(随机组)脱氧寡核苷酸导入体外培养的VSMCs;应用逆转录PCR和Western Blot半定量测定及计算机图像分析的方法,观测寡核苷酸对bFGF基因表达的影响.结果:体外培养的大鼠VSMCs均有bFGF mRNA和蛋白表达,反义bFGF寡核苷酸作用于VSMCs后1~5 d,bFGF mRNA表达和蛋白表达均明显减弱,反义组与对照组比较,mRNA、蛋白表达在第1~5 d表达差异均有统计学意义;而正义、随机组无此效应,与单纯脂质体和空白对照组相比差异无统计学意义(P>0.05).结论:反义bFGF寡核苷酸对血管平滑肌细胞bFGF基因表达的抑制作用具有序列特异性.