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目的:制备稳定表达FasL蛋白的小鼠骨髓源树突状细胞(DC)并探讨其体外诱导异系T淋巴细胞凋亡的机制.方法:采用培养基选择法体外培养小鼠骨髓源DC,脂质体法转染FasL基因至小鼠成熟DC,流式细胞仪检测转染前后FasL蛋白的表达.混合淋巴细胞培养,四甲基偶氮唑蓝(MTY)法检测DC对异系T淋巴细胞增殖的影响,流式细胞仪检测诱导异系T淋巴细胞凋亡的能力.结果:体外培养可获得成熟的小鼠骨髓源DC,转染FasL基因的DC较未转染DC FasL蛋白表达明显升高,混合淋巴细胞培养结果显示,FasL.转染后DC对异系T淋巴细胞刺激指数明显下降(P<0.01),且诱导T淋巴细胞凋亡的能力明显增加(P<0.01).结论:培养基选择法可收获大量骨髓源DC,具有典型形态,高表达MHCⅡ和共刺激分子,所获骨髓源DC能激活初始型T细胞免疫应答.脂质体转染FasL基因至小鼠骨髓源DC,可以使DC高表达FasL蛋白.转染FasL的DC体外刺激异系T淋巴细胞增殖的能力下降,且能明显诱导T淋巴细胞凋亡.

作者:付蔚华;杨志强;赵娜;邱宇杰;朱理玮

来源:天津医药 2008 年 36卷 3期

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作者:
付蔚华;杨志强;赵娜;邱宇杰;朱理玮
来源:
天津医药 2008 年 36卷 3期
标签:
抗原,CD95 脂质体 转染 树突细胞 T淋巴细胞 细胞凋亡 小鼠
目的:制备稳定表达FasL蛋白的小鼠骨髓源树突状细胞(DC)并探讨其体外诱导异系T淋巴细胞凋亡的机制.方法:采用培养基选择法体外培养小鼠骨髓源DC,脂质体法转染FasL基因至小鼠成熟DC,流式细胞仪检测转染前后FasL蛋白的表达.混合淋巴细胞培养,四甲基偶氮唑蓝(MTY)法检测DC对异系T淋巴细胞增殖的影响,流式细胞仪检测诱导异系T淋巴细胞凋亡的能力.结果:体外培养可获得成熟的小鼠骨髓源DC,转染FasL基因的DC较未转染DC FasL蛋白表达明显升高,混合淋巴细胞培养结果显示,FasL.转染后DC对异系T淋巴细胞刺激指数明显下降(P<0.01),且诱导T淋巴细胞凋亡的能力明显增加(P<0.01).结论:培养基选择法可收获大量骨髓源DC,具有典型形态,高表达MHCⅡ和共刺激分子,所获骨髓源DC能激活初始型T细胞免疫应答.脂质体转染FasL基因至小鼠骨髓源DC,可以使DC高表达FasL蛋白.转染FasL的DC体外刺激异系T淋巴细胞增殖的能力下降,且能明显诱导T淋巴细胞凋亡.