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目的探讨表达c-FLIPs重组腺病毒诱导淋巴细胞抗凋亡作用.方法采用RT-PCR方法,从人T淋巴细胞株的总RNA中克隆c-FLIPs基因;通过pAdeasy系统,构建表达c-FLIPs的重组腺病毒Ad.c-FLIPs;Hochest染色法及PI染色流式细胞仪检测anti-Apo-1诱导感染Ad.c-FLIPs后的H9细胞凋亡.结果采用RT-PCR方法从人T淋巴细胞株中扩增出c-FLIPs基因;构建重组腺病毒Ad.c-FLIPs;经Hoechst染色,荧光显微镜下观察细胞核的形态,结果发现,经anti-Apo-1诱导凋亡处理24 h后,未经Ad.c-FLIPs感染的H9细胞有大量的细胞核呈浓染致密的固缩形态或颗粒状荧光的凋亡细胞;Ad.c-FLIPs感染的H9细胞中细胞核呈浓染致密的固缩形态或颗粒状荧光的细胞数明显减少,大部分细胞染色质呈弥漫均匀低强度荧光;流式细胞仪分析经PI染色后的H9细胞,未经Ad.c-FLIPs预处理的H9细胞在anti-Apo-1作用24 h后,细胞的凋亡率分别为48.33

作者:冯子毅;李宝金;刘晓平

来源:中华实验和临床病毒学杂志 2005 年 19卷 2期

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作者:
冯子毅;李宝金;刘晓平
来源:
中华实验和临床病毒学杂志 2005 年 19卷 2期
标签:
腺病毒科感染 基因,c-FLIPs CD4淋巴细胞计数 T淋巴细胞 抗原,CD95 细胞凋亡
目的探讨表达c-FLIPs重组腺病毒诱导淋巴细胞抗凋亡作用.方法采用RT-PCR方法,从人T淋巴细胞株的总RNA中克隆c-FLIPs基因;通过pAdeasy系统,构建表达c-FLIPs的重组腺病毒Ad.c-FLIPs;Hochest染色法及PI染色流式细胞仪检测anti-Apo-1诱导感染Ad.c-FLIPs后的H9细胞凋亡.结果采用RT-PCR方法从人T淋巴细胞株中扩增出c-FLIPs基因;构建重组腺病毒Ad.c-FLIPs;经Hoechst染色,荧光显微镜下观察细胞核的形态,结果发现,经anti-Apo-1诱导凋亡处理24 h后,未经Ad.c-FLIPs感染的H9细胞有大量的细胞核呈浓染致密的固缩形态或颗粒状荧光的凋亡细胞;Ad.c-FLIPs感染的H9细胞中细胞核呈浓染致密的固缩形态或颗粒状荧光的细胞数明显减少,大部分细胞染色质呈弥漫均匀低强度荧光;流式细胞仪分析经PI染色后的H9细胞,未经Ad.c-FLIPs预处理的H9细胞在anti-Apo-1作用24 h后,细胞的凋亡率分别为48.33