目的:采用rAAV Helper free System构建hVEGF165腺相关病毒和增强型绿色荧光蛋白腺相关病毒,并初步鉴定其感染情况.方法:采用AAV-Helper free system包装系,构建hVEGF165腺相关病毒和增强型绿色荧光蛋白腺相关病毒载体质粒.应用电穿孔方法质粒共转染HEK293细胞,分离纯化后获得rAAV-hVEGF165和rAAV-EGFP,AVSachTM ELISA法测定rAAV颗粒滴度,并鉴定其对HEK293细胞的感染情况.结果:包装纯化后获得病毒滴度可达到2×1011,电镜观察病毒颗粒均匀,病毒大小20-25 nm,呈多面体形态.结论:成功包装hVEGF165腺相关病毒和增强型绿色荧光蛋白腺相关病毒.
作者:李曦铭;王林;韩瑞发;刘利维;丛洪良
来源:天津医药 2008 年 36卷 10期