目的：通过改善虾类包被抗原质量，提高血清特异性IgE(sIgE)检测的敏感性。方法制备中华对虾蛋白溶液，经酶联免疫印迹实验鉴定主要的致敏蛋白组分，葡聚糖凝胶层析法初步分离大于55 ku的蛋白组分，SDS-PAGE技术分析其蛋白。分别使用虾蛋白溶液和分离的蛋白作为包被抗原包被96微孔板，采用酶斑点印迹和间接酶联免疫吸附法（间接ELISA法）初步评价纯化后的抗原是否能够提高血清sIgE检测结果的敏感性。结果酶联免疫印迹实验显示中华对虾蛋白溶液中>55 ku的蛋白组分是主要的致敏蛋白，葡聚糖凝胶层析法初步分离了>55 ku的蛋白组分，其中主要包含10条明显蛋白条带；酶斑点印迹显示，以纯化后蛋白作为包被抗原，可提高弱阳性血清斑点光密度。同时，两种包被抗原的间接ELISA结果显示，虾有效致敏成分作为包被抗原时，92.9
作者：任杰；单立新；李韶深；陈凯；侯丽英；李会强
来源：天津医药 2014 年 5期
