目的：观察自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤（3-MA）对乙醇诱导的肝星状细胞（HSC）活化作用，并探讨其作用机制。方法体外培养大鼠肝星状细胞株HSC-T6，设立空白对照组、阳性对照组（乙醇刺激组）、低剂量组（5 mmol/L 3-MA+100 mmol/L乙醇）、高剂量组（10 mmol/L 3-MA+100 mmol/L乙醇）。RT-PCR分析各组HSC活化标志蛋白α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)及Ⅰ型胶原基因表达，Western blot法检测各组HSC中自噬水平标志蛋白LC3Ⅱ、α-SMA、Ⅰ型胶原表达；MTT法检测3-MA对乙醇诱导的HSC增殖的影响。结果与空白对照组比较，阳性对照组中α-SMA、Ⅰ型胶原mRNA和蛋白表达及LC3Ⅱ表达量明显增加（P＜0.05），高剂量组却显著减少（P＜0.01）；与阳性对照组比较，低剂量组和高剂量组中α-SMA、Ⅰ型胶原mRNA和蛋白表达及LC3Ⅱ表达量逐渐减少（P＜0.05）；与低剂量组比较，高剂量组中α-SMA、Ⅰ型胶原mRNA和蛋白表达及LC3Ⅱ表达减少（P＜0.05）。与阳性对照组比较，加入3-MA处理后的HSC增殖显著减少（P＜0.05）。结论3-MA可抑制乙醇诱导的HSC-T6细胞中LC3Ⅱ蛋白的表达、α-SMA、Ⅰ型胶原mRNA及蛋白的表达，抑制HSC增殖，且高剂量的作用更明显。
作者：何月；贾宝辉；刘曼；罗文；张吉翔
来源：天津医药 2014 年 7期
