目的:探讨RNA干扰技术沉默羧基末端结合蛋白(CtBP)2基因表达对前列腺癌PC3细胞增殖能力的影响。方法实验分为空白对照组、转染空质粒组、转染shRNA组。设计并合成针对CtBP2的3条特异性短发卡RNA(shRNA)模板,构建CtBP2-shRNA重组质粒,转染PC3细胞。通过RT-PCR检测CtBP2 mRNA的表达水平;采用Western blot法检测CtBP2蛋白表达的水平,运用MTT法检测沉默CtBP2对PC3细胞体外增殖的抑制作用。结果将CtBP2-shRNA转染前列腺癌PC3细胞后,CtBP2 mRNA以及蛋白的表达水平均明显下降。沉默CtBP2表达后,MTT结果显示转染shRNA组的PC3细胞较空白对照组、转染空质粒组细胞增殖能力明显减弱,差异有统计学意义(P<0.01)。结论 CtBP2-shRNA可抑制CtBP2在前列腺癌细胞中的表达并抑制肿瘤细胞生长,提示CtBP2可作为前列腺癌基因治疗的一个新靶点。
作者:刘妍;徐勇;高超;张志宏
来源:天津医药 2014 年 10期