目的 研究多聚腺苷二磷酸核糖聚合酶1(PARP1)特异性小分子干扰RNA(siRNA)对雄激素非依赖性前列腺癌PC3细胞株增殖的影响并初步探讨其作用机制. 方法 设计合成3条PARP1特异性siRNA序列,进行脂质体转染后,通过RT-PCR、蛋白质印迹法检测其对PARP1的干扰效果,筛选出最佳干扰效果的2条siRNA序列；通过单溶液细胞增殖检测法检测干扰PC3细胞内源性PARP1表达对细胞增殖的影响,并检测细胞内Akt及其下游GSK3β活化水平的变化. 结果 与空白对照组相比,转染阴性对照序列对PARP1的mRNA和蛋白表达水平无明显影响,而转染RNA干扰序列1706、2003和2907均可以明显干扰PARP1的表达,其中mRNA抑制率分别为(52.07±4.65)％、(44.38 ±9.15)％和(22.05 ±6.65)％,蛋白抑制率分别为(86.86±4.94)％、(83.30±7.18)％和(63.05 ± 10.19)％.RNA干扰序列1706和2003对PC3细胞的增殖抑制率分别为(38.93 ±3.87)％和(34.93±1.21)％,并可以下调细胞内Akt、GSK3β的磷酸化水平. 结论 PARP1特异性siRNA可以明显干扰PC3细胞内源性PARP1的表达并抑制细胞增殖,该抑制作用与Akt的活化抑制以及其下游GSK3β的激活有关.
作者：吴文起；孔珍珍；朱寒亮；段小鹿；李舒珏
来源：中华泌尿外科杂志 2013 年 34卷 2期
