目的 观察巨噬细胞极化上清对心肌成纤维细胞活化的影响.方法 提取SD大鼠的骨髓细胞和心肌成纤维细胞.利用巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)处理骨髓细胞后,加入刺激因子:M0(无刺激因子)、M1(100μg/L脂多糖+10μg/L干扰素-γ)、M2(20μg/L白细胞介素-4)诱导巨噬细胞极化.将极化后的不同型别巨噬细胞及其培养上清分别与心肌成纤维细胞共培养,分别设空白对照组、M0组、M1组和M2组,通过细胞免疫荧光检测心肌成纤维细胞中纤维化蛋白的表达水平;实时荧光定量逆转录聚合酶链反应检测巨噬细胞和成纤维细胞特征分子的表达;Western blot检测纤维化相关蛋白及转化生长因子β受体(TGFβR)、血小板衍生生长因子受体(PDGFRs)信号通路活化情况.结果 经M-CSF及相应刺激因子诱导,成功获得M1和M2型巨噬细胞.细胞共培养结果显示,与M0组相比,M1组上清培养的心肌成纤维细胞中胶原蛋白1(Col1a1)和Col3a1的mRNA水平以及平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达水平显著降低(P<0.05),而M2组上清培养的心肌成纤维细胞中Col1a1和Col3a1的mRNA水平以及α-SMA、结缔组织生长因子(CCN2)表达水平显著升高(P<0.05).M1组上清培养的心肌成纤维细胞中PDGFRβ蛋白磷酸化水平显著低于M0组(P<0.01),而M2组上清培养的心肌成纤维细胞中PDGFRβ蛋白磷酸化水平显
作者：吴惠娟；张盛昔；杨潇；胡因铭；王乐旬；郭姣
来源：天津医药 2020 年 48卷 7期
