目的 分析血小板源性生长因子受体(PDGFR)-β信号在神经干细胞(NSCs)自我更新过程中的作用.方法 分离与培养生后第1、28天(P1、P28) PDGFR-β基因敲除小鼠(PDGFR-β-/-)神经源性区域NSCs,培养第2代神经球,计算其数量及直径;利用5-溴脱氧尿嘧啶核苷(BrdU)参入法和末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP原位末端标记(TUNEL)法评价其干细胞活性;利用PCRArray法分析其神经新生相关基因的调节;通过添加外源性脑源性神经营养因子(BDNF)分析其在NSCs自我更新过程中的辅助作用.结果 PDGFR-β-/-NSCs的干细胞活性明显低于鼠龄相同的对照组[BrdU(%) P1:73.3 ±2.7比88.7 ±3.6,t =2.773,P<0.05;P28:28.6 ±9.6比68.2±4.5,t=6.302,P<0.05.TUNEL(%)P1:14.5±2.1比9.3±1.3,t=7.222,P<0.05.第2代神经球的形成数目(只/孔)P1:25.9 ±1.3比117.6 ±3.6,t=4.236,P<0.01;P28:13.8± 0.7比19.8 ±0.6,t=2.116,P<0.01.直径(μm)P1:67.7±1.9比69.1 ±2.0,t=3.211,P<0.01;P28:33.4 ±0.8比37.8±0.8,t=2.354,P<0.01].同一基因型细胞中,P28 NSCs的干细胞活性明显低于P1细胞.PCR Array显示PDGFR-β-/-NSCs中,BDNF和成纤维细胞生长因子-2的表达量明显降低(-2.04±0.25,t=2.653,P<0.05;-3.24±0.37,t=1.324,P<0.05),而Noggin
作者:徐桂华;申杰
来源:中华神经科杂志 2015 年 48卷 7期