目的 观察石蒜碱(LYC)对脂多糖(LPS)诱导的原代小胶质细胞炎症反应和表型变化的影响,并探讨其作用机制.方法 将培养的原代小胶质细胞分为对照组、LYC组(0.1、0.5、1和5μmol/L LYC)、LPS组(0.1 mg/L LPS)和LPS(0.1 mg/L LPS)+LYC组(5μmol/L LYC).倒置显微镜观察细胞形态变化;流式细胞术检测原代小胶质细胞的纯度及LPS诱导原代小胶质细胞向两种表型转化的情况;CCK-8法检测细胞活性;实时荧光定量PCR(qPCR)检测白细胞介素(IL)-1β、IL-6、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)以及不同表型小胶质细胞表面标志物mRNA表达;Griess法检测一氧化氮(NO)含量;免疫印迹法检测细胞TLR4、p-NF-κB p65蛋白表达情况.结果 原代小胶质细胞纯度达95%以上.对照组及各浓度LYC组细胞活性差异无统计学意义.后续实验以5μmol/L的LYC为药物浓度.与LPS组相比,LPS+LYC组的阿米巴样小胶质细胞数量明显减少,IL-1β、IL-6、TNF-αmRNA表达水平以及NO含量降低,CD86 mRNA表达水平和表型比例降低,CD206 mRNA表达水平和表型比例升高,TLR4和p-NF-κB p65蛋白表达水平降低(P<0.01).结论 LYC通过TLR4/NF-κB信号通路抑制LPS诱导的原代小胶质细胞炎症反应,并促进其向"抑炎型"极化.
作者:抗晶晶;曹翔
来源:天津医药 2022 年 50卷 9期