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目的 探讨高糖条件下miR-192对肾小球系膜细胞增殖、迁移及细胞外基质形成的影响及可能的作用机制.方法 体外培养人肾小球系膜细胞并分为6组:正糖(NG,5.6 mmol/L葡萄糖)组、高糖(HG,25 mmol/L葡萄糖)组、正糖加miR-192模拟物(NG+mimics)组、高糖加miR-192模拟物(HG+mimics)组、正糖加miR-192抑制剂(NG+inhibitor)组、高糖加miR-192抑制剂(HG+inhibitor)组.干预24 h后,CCK-8法检测细胞增殖活性,划痕实验检测细胞迁移能力,实时荧光定量PCR(qPCR)技术检测miR-192、小窝蛋白1(CAV-1)、表皮生长因子(EGF)、1型胶原蛋白(COLⅠ)、纤连蛋白(FN)mRNA水平,Western blot检测相关蛋白表达.结果 与NG组相比,HG组细胞增殖率和划痕愈合率增加,EGF、FN、COLⅠmRNA和蛋白表达升高,CAV-1 mRNA和蛋白表达降低(均P<0.05).在NG组和HG组分别加入miR-192 inhibitor后,细胞增殖率和划痕愈合率减少,EGF、FN、COLⅠmRNA和蛋白表达降低,CAV-1 mRNA和蛋白表达升高(均P<0.05),HG组加入miR-192 inhibitor变化更加明显.在NG组和HG组分别加入miR-192 mimics后,细胞增殖率和划痕愈合率增加,EGF、FN、COLⅠmRNA和蛋白表达升高,CAV-1 mRNA和蛋白表达降低(均P<0.05).结论 高糖通过miR-192-CAV-1-EGF途径增加肾小球系膜细胞增殖和迁移,导致细胞

作者:吴玮熙;刘帅辉;周赛君;刘红岩;张睿;于珮

来源:天津医药 2022 年 50卷 10期

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作者:
吴玮熙;刘帅辉;周赛君;刘红岩;张睿;于珮
来源:
天津医药 2022 年 50卷 10期
标签:
糖尿病肾病 肾小球系膜细胞 表皮生长因子 细胞外基质 细胞增殖 微小RNA-192 小窝蛋白1
目的 探讨高糖条件下miR-192对肾小球系膜细胞增殖、迁移及细胞外基质形成的影响及可能的作用机制.方法 体外培养人肾小球系膜细胞并分为6组:正糖(NG,5.6 mmol/L葡萄糖)组、高糖(HG,25 mmol/L葡萄糖)组、正糖加miR-192模拟物(NG+mimics)组、高糖加miR-192模拟物(HG+mimics)组、正糖加miR-192抑制剂(NG+inhibitor)组、高糖加miR-192抑制剂(HG+inhibitor)组.干预24 h后,CCK-8法检测细胞增殖活性,划痕实验检测细胞迁移能力,实时荧光定量PCR(qPCR)技术检测miR-192、小窝蛋白1(CAV-1)、表皮生长因子(EGF)、1型胶原蛋白(COLⅠ)、纤连蛋白(FN)mRNA水平,Western blot检测相关蛋白表达.结果 与NG组相比,HG组细胞增殖率和划痕愈合率增加,EGF、FN、COLⅠmRNA和蛋白表达升高,CAV-1 mRNA和蛋白表达降低(均P<0.05).在NG组和HG组分别加入miR-192 inhibitor后,细胞增殖率和划痕愈合率减少,EGF、FN、COLⅠmRNA和蛋白表达降低,CAV-1 mRNA和蛋白表达升高(均P<0.05),HG组加入miR-192 inhibitor变化更加明显.在NG组和HG组分别加入miR-192 mimics后,细胞增殖率和划痕愈合率增加,EGF、FN、COLⅠmRNA和蛋白表达升高,CAV-1 mRNA和蛋白表达降低(均P<0.05).结论 高糖通过miR-192-CAV-1-EGF途径增加肾小球系膜细胞增殖和迁移,导致细胞