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[目的]研究丹参多酚酸盐(Salvianolate)对过氧化氢(H202)所致乳鼠心肌细胞凋亡的影响,并探讨其可能的作用机制.[方法]于无菌环境下分离并培养乳鼠心肌细胞72 h后随机分为空白对照组、H2O2组、丹参多酚酸盐(50、100和200 mg/L)+H2O2组,每组设8个复孔;给药干预24 h后,检测培养液中谷草转氨酶(AST)、磷酸肌酸激酶(CPK)、乳酸脱氢酶(ILDH)含量,四甲基噻唑蓝(MTT)法检测细胞存活率,通过流氏细胞术(Flow Cytometry)检测细胞凋亡状况并计算凋亡率:逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测AKT mRNA和bcl-2 mRNA 、Bax mRNA表达并计算bcl-2/Bax表达比值,Western blotting法检测细胞中半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(caspase-3)、核转录因子-kB(NF-kB)表达并进行半定量分析,测定细胞中超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)活性和丙二醛(MDA)含量.[结果]与H202组比较,丹参多酚酸盐(100、200 mg/L)+H2O2组培养液中AST、CPK、LDH含量显著降低,细胞存活率显著升高,细胞凋亡率显著降低.细胞中细胞中AKT mRNA 、bcl-2 mRNA表达显著上调,Bax mRNA表达显著下调,bcl-2/Bax表达比值显著升高,caspase-3、NF-kB表达显著下调,SOD 、CAT活性显著升高且MDA含量显著降低,上述差异均具有统计学意义(P<0.05或P<0.01).[结论]丹参多酚酸盐对H2O

作者:李兵

来源:天津中医药 2016 年 33卷 8期

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李兵
来源:
天津中医药 2016 年 33卷 8期
标签:
丹参多酚酸盐 过氧化氢 心肌细胞 凋亡 影响 Salvianolate H2O2 cardiomyocyte apoptosis effect
[目的]研究丹参多酚酸盐(Salvianolate)对过氧化氢(H202)所致乳鼠心肌细胞凋亡的影响,并探讨其可能的作用机制.[方法]于无菌环境下分离并培养乳鼠心肌细胞72 h后随机分为空白对照组、H2O2组、丹参多酚酸盐(50、100和200 mg/L)+H2O2组,每组设8个复孔;给药干预24 h后,检测培养液中谷草转氨酶(AST)、磷酸肌酸激酶(CPK)、乳酸脱氢酶(ILDH)含量,四甲基噻唑蓝(MTT)法检测细胞存活率,通过流氏细胞术(Flow Cytometry)检测细胞凋亡状况并计算凋亡率:逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测AKT mRNA和bcl-2 mRNA 、Bax mRNA表达并计算bcl-2/Bax表达比值,Western blotting法检测细胞中半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(caspase-3)、核转录因子-kB(NF-kB)表达并进行半定量分析,测定细胞中超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)活性和丙二醛(MDA)含量.[结果]与H202组比较,丹参多酚酸盐(100、200 mg/L)+H2O2组培养液中AST、CPK、LDH含量显著降低,细胞存活率显著升高,细胞凋亡率显著降低.细胞中细胞中AKT mRNA 、bcl-2 mRNA表达显著上调,Bax mRNA表达显著下调,bcl-2/Bax表达比值显著升高,caspase-3、NF-kB表达显著下调,SOD 、CAT活性显著升高且MDA含量显著降低,上述差异均具有统计学意义(P<0.05或P<0.01).[结论]丹参多酚酸盐对H2O