目的 探讨CACNA2D3在顺铂诱导的HEI-OC1细胞凋亡中的作用及机制.方法 利用shRNA干扰技术敲减HEI-OC1细胞中CACNA2D3(sh-Cac3)表达,空白载体(sh-Vector)转染对照细胞,sh-Cac3细胞和sh-Vector细胞分别进行正常培养及顺铂干预.流式细胞术检测线粒体膜电位、凋亡情况、细胞内钙离子浓度;West-ern blot 检测细胞凋亡相关蛋白(Bc12、Cleaved-PARP1)和自噬标记蛋白LC3Ⅱ;免疫荧光法观察Tunel染色.结果 正常培养下,CACNA2D3敲减会降低细胞内钙离子浓度(P＜0.05),但不会影响细胞凋亡和自噬.顺铂干预下,相较于sh-Vector细胞,sh-Cac3细胞的线粒体膜电位降低程度更高(P＜0.01);细胞凋亡率更高(9.41±0.66％vs 11.53±0.45％,P＜0.01);Bc12的表达显著降低(P＜0.01),而 Cleaved-PARP1 的表达显著升高(P＜0.01);Tunel染色阳性率更高(3.08±0.14％vs 6.40±0.43％,P＜0.001).此外,顺铂干预后sh-Cac3细胞的LC3Ⅱ的表达明显高于sh-Vector细胞(P＜0.01).结论 CACNA2D3敲减通过调节钙相关自噬增强了顺铂诱导的HEI-OC1细胞凋亡;CACNA2D3的表达调控可能是顺铂耳毒性靶点治疗的新策略.
作者：田雨鑫；李壮壮；王菁菁；冯艳梅；陈正侬
来源：听力学及言语疾病杂志 2022 年 30卷 3期
