[目的]检测RNA干扰自噬相关基因16L1 (autophagy-related gene 16L1,ATG16L1)表达后胃癌细胞的自噬活性,观察在ATG16L1敲减下顺铂(DDP)对胃癌细胞凋亡的影响.[方法]用ATG16L1 siRNA技术构建ATG16L1低表达的人胃癌BGC823细胞株作为干扰组,转染阴性干扰的BGC823细胞作为阴性转染组,未转染的BGC823细胞作为对照组;Western blot检测各组细胞中ATG16L1的表达和自噬标志物微管相关轻链蛋白3(microtubule-associated protein 1M1B-light chain 3,LC3)及死骨片蛋白1(sequestosome 1,P62)的表达;免疫荧光观察LC3II情况.CCK-8实验检测DDP处理后各组细胞增殖能力,计算IC50值.经DDP刺激后,流式细胞术检测细胞凋亡,再用Western blot检测凋亡相关蛋白Bcl-2、Cleaved caspase-3、Cleaved caspase-9蛋白表达.最后应用公共数据库Kaplan-Meier对多组胃癌患者mRNA表达谱进行分析,预测ATG16L1的表达水平对患者预后的影响.[结果]ATG16L1 siRNA干扰组较对照组蛋白表达水平明显降低(P＜0.001);LC3II水平下降(P＜0.01),P62水平上升(P＜0.01),并且LC3荧光强度下降(P＜0.05).经DDP诱导后,干扰组细胞增殖明显受抑(P＜0.001),细胞凋亡率明显增加(P＜0.01);ATG16L1干扰组中促凋亡分子cleaved caspase-3、cleaved caspase-9表达比对照组

作者：张玉梅；林方方；冯凡；陈琦；刘月琴；许文林；沈慧玲

来源：中国肿瘤 2019 年 28卷 8期