人工合成黄芪甲苷(AstragalosideⅣ,简称AST)的免疫抗原AST-BSA(黄芪甲苷-牛血清白蛋白)和包被抗原AST-OVA(黄芪甲苷-卵清白蛋白),以AST-BSA为免疫原,分5次免疫Balb/C小鼠,取免疫脾细胞与骨髓瘤细胞进行融合,HAT筛选,有限稀释法克隆.建立分泌单克隆抗体的杂交瘤细胞株.采用间接ELISA和间接竞争ELISA(酶联免疫吸附测定)法分别检测抗体效价和特异性.结果免疫小鼠血清抗体效价达1∶27000,获得两株稳定分泌抗AST单克隆抗体的细胞株,分别命名为1D5和3D11,以3D11细胞株制备的单抗检测AST显示在0.01～1μg/mL呈线性关系,检测范围达50～300 ng/mL,制备的单抗可用于AST含量的检测.该方法有望用于AST免疫检测试剂的研制开发.
作者：于生兰；欧阳臻；徐加兵；王帅兵
来源：天然产物研究与开发 2013 年 25卷 11期
