背景:M2型丙酮酸激酶( PKM2)在肿瘤组织中呈特异性高表达,与肿瘤的生长和糖酵解水平密切相关,是潜在的治疗靶点。目的:探讨siRNA沉默PKM2对胃癌SGC-7901细胞增殖、凋亡、迁移、侵袭以及糖酵解水平的影响。方法:选择未转染SGC-7901细胞、转染空质粒pU6 SGC-7901细胞以及转染PKM2 siRNA的SGC-7901细胞,采用蛋白质印迹法和Real-time PCR检测PKM2 mRNA和蛋白表达;免疫荧光法检测PKM2在细胞内的表达和分布;CCK-8法、流式细胞分析、细胞迁移和细胞侵袭实验检测细胞增殖、凋亡、迁移以及侵袭能力;蛋白质印迹法、分光光度法分别检测葡萄糖转运蛋白-1(Glut-1)、乳酸脱氢酶A(LDHA)蛋白表达以及葡萄糖、乳酸浓度、乳酸脱氢酶(LDH)活性。结果:与其余两组相比,PKM2 siRNA转染组细胞PKM2 mRNA和蛋白表达明显下降( P<0.05),胞内表达明显减弱,细胞增殖、迁移和侵袭能力明显下降,细胞凋亡明显增加( P<0.05),Glut-1、LDHA蛋白表达明显下降( P<0.05),葡萄糖摄取率、乳酸产量、LDH活性明显减低(P<0.05)。结论:RNA干扰能抑制胃癌SGC-7901细胞PKM2 mRNA和蛋白表达,进而抑制胃癌细胞的增殖能力和糖酵解水平。
作者:朱珠;陈敏;张晓琦;张斌;丁希伟;杨燕;邹晓平
来源:胃肠病学 2014 年 8期