背景：范可尼贫血（ FA）通路作为DNA交联损伤修复的主要通路在维持染色体稳定性方面起重要作用。近年来，有关FA通路在DNA损伤以及肿瘤发病机制等方面的研究越来越多。目的：研究人结直肠癌细胞株SW480中RAD18蛋白与FANCD2蛋白是否存在相互作用。方法：应用免疫共沉淀法沉淀抗原抗体复合物；应用蛋白质印迹法检测复合物中兔抗人FANCD2和RAD18蛋白的表达。将GST-RAD18和GST质粒分别转化到BL21细菌中诱导目的蛋白表达，提取细菌总蛋白，以GST琼脂糖珠结合GST-RAD18蛋白，与SW480细胞裂解液孵育后，加入兔抗人FANCD2抗体，进行蛋白质印迹检测。结果：在利用FANCD2抗体沉淀下来的复合物中可检测到RAD18蛋白，且在利用RAD18抗体沉淀下来的复合物中可检测到FANCD2蛋白；GST-RAD18蛋白作诱饵蛋白时可以捕获SW480细胞中的FANCD2蛋白。结论：RAD18蛋白与 FANCD2蛋白在 SW480细胞内存在相互作用；GST-RAD18蛋白与FANCD2蛋白也存在相互作用。
作者：乐贻军；王红；钟雄平；刘超；陈业金
来源：胃肠病学 2014 年 11期
