目的与肝硬化对比,研究肝细胞癌中差异表达的基因,构建在肝硬化基础上发生癌变的肝细胞之差异表达的cDNA消减文库.方法采用抑制性消减杂交获得差异表达基因片段,T/A克隆,蓝白斑筛选,在自动测序仪上进行基因测序,做同源性分析.结果经过巢式PCR扩增后,得到差异表达的cDNA,琼脂糖凝胶电泳显示为一弥散条带;35个差异表达的克隆被分离,基因表达序列标签长度在1l2～755bp之间.序列分析揭示28个克隆是来自以前描述过的基因,而另外7个在GenBank/EMBL/DDBJ数据库没有匹配序列,可能代表新基因.结论实验结果表明从肝硬化发展至肝细胞癌涉及到多个基因的差异表达;本研究在成功地构建出消减基因文库的同时,也证明了抑制性消减杂交技术对寻找差异表达基因是十分适用的.
作者：朱武凌；段芳龄；韩有志；刘东亮；张玲；马军；白经修
来源：胃肠病学和肝病学杂志 2000 年 9卷 4期
