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目的应用携带大鼠白介素-10(IL-10)基因的重组缺陷型腺病毒(AdIL-10)感染原代培养的大鼠肝星状细胞(HSC),通过体外实验观察外源性大鼠IL-10基因对HSC中α-SMA、TGF-β1和TNF-α表达的影响.方法以胶原酶原位灌注、密度梯度离心法分离大鼠原代HSC,并用AdIL-10感染HSC(同时设AdGFP对照组及正常对照组),分别采用RT-PCR法和Western Blot法检测感染后HSC中IL-10 mRNA及蛋白水平的表达;Western Blot法检测HSC中转化生长因子-β1(TGF-β1)及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的表达;免疫组织化学法检测α-SMA在HSC中的表达.运用图像处理系统对结果加以分析.结果感染AdIL-10的HSC中IL-10的mRNA及蛋白水平均较对照组上调(P<0.001);而其表达的TGF-β1、TNF-α及α-SMA与对照组相比明显降低(P均<0.001);正常对照组和AdGFP对照组中上述指标的表达均无明显差异(P均>0.05).结论外源性大鼠IL-10基因导入大鼠HSC后可能通过影响TGF-β1及TNF-α的表达而抑制HSC的活化.

作者:孙巧玲;李定国;胡良凯;孙超;汪保灿;陈源文

来源:胃肠病学和肝病学杂志 2006 年 15卷 2期

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作者:
孙巧玲;李定国;胡良凯;孙超;汪保灿;陈源文
来源:
胃肠病学和肝病学杂志 2006 年 15卷 2期
标签:
白介素-10基因 转化生长因子-β1 肿瘤坏死因子-α 肝星状细胞
目的应用携带大鼠白介素-10(IL-10)基因的重组缺陷型腺病毒(AdIL-10)感染原代培养的大鼠肝星状细胞(HSC),通过体外实验观察外源性大鼠IL-10基因对HSC中α-SMA、TGF-β1和TNF-α表达的影响.方法以胶原酶原位灌注、密度梯度离心法分离大鼠原代HSC,并用AdIL-10感染HSC(同时设AdGFP对照组及正常对照组),分别采用RT-PCR法和Western Blot法检测感染后HSC中IL-10 mRNA及蛋白水平的表达;Western Blot法检测HSC中转化生长因子-β1(TGF-β1)及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的表达;免疫组织化学法检测α-SMA在HSC中的表达.运用图像处理系统对结果加以分析.结果感染AdIL-10的HSC中IL-10的mRNA及蛋白水平均较对照组上调(P<0.001);而其表达的TGF-β1、TNF-α及α-SMA与对照组相比明显降低(P均<0.001);正常对照组和AdGFP对照组中上述指标的表达均无明显差异(P均>0.05).结论外源性大鼠IL-10基因导入大鼠HSC后可能通过影响TGF-β1及TNF-α的表达而抑制HSC的活化.