目的 构建羧基端缺失30个氨基酸的HBx蛋白的真核表达质粒,并在真核细胞内稳定表达. 方法 提取HBV-DNA阳性血清总DNA,PCR扩增截短变异的HBx基因(HBx),克隆到真核质粒pEGFP-N3中,酶切及测序鉴定.利用脂质体将重组质粒转染HepG2细胞,通过Western blot方法检测细胞内截短变异的HBx蛋白的表达. 结果 构建的重组质粒pEGFP-N3/x经酶切及测序鉴定结果正确.质粒pEGFP-N3/x转染细胞后可检测到目的 蛋白. 结论 成功构建在真核细胞内稳定表达的重组质粒pEGFP-N3/x.
作者：张韡；潘庆春；臧国庆
来源：胃肠病学和肝病学杂志 2010 年 19卷 12期
