目的 制备肿瘤相关糖蛋白-72(TAG-72)嵌合锚定T细胞,体内外实验检测其对肝癌的抑癌活性.方法 分离健康人外周血单个核细胞(PBMC),采用脂质体lipofectamineTM 2000介导的细胞转染,将已制备的重组真核表达载体抗TAG-72 scFv-CD3ξ-pcDNA3.0导入PBMC,获得肿瘤相关糖蛋白-72(TAG-72)嵌合锚定T细胞,以此为实验组治疗细胞;用SDS-PAGE检测TAG-72嵌合锚定T细胞中抗TAG-72 scFv-CD3ξ嵌合分子的表达,并用Western blotting证实.用转染空载体pcDNA3.0的PBMC作为对照组治疗细胞.将实验组及对照组的治疗细胞分别经尾静脉注射治疗荷TAG-72+肝癌细胞HepG2、荷TAG-72肝癌细胞BEL7402裸鼠动物模型,观察对裸鼠的抑癌效应.结果 SDS-PAGE检测TAG-72嵌合锚定T细胞嵌合分子抗TAG-72 seFv-CD3ξ的表达,显示大小为47 kDa的融合蛋白片段,与抗TAG-72 scFv-CD3ξ的理论值相符;Western blotting证实该片段CD3呈阳性表达.TAG-72嵌合锚定T细胞与肝癌细胞HepG2共培养后可对后者产生G1期阻滞.用TAG-72嵌合锚定T细胞经尾静脉注射治疗荷瘤裸鼠,发现实验组细胞对荷HepG2细胞裸鼠存活时间、体质量、肿瘤包块大小等方面疗效优于荷BEL7402细胞裸鼠的疗效,两者比较差异有统计学意义(P<0.05).结论 TAG-72嵌合锚定T细胞可特异性抑制荷TAG-72+肝癌
作者:徐宏勇;徐立;李开宗
来源:胃肠病学和肝病学杂志 2014 年 23卷 5期