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目的:观察结肠癌转移相关基因1 (MACC1)对膀胱癌细胞株T24增殖、侵袭能力以及对肝细胞生长因子信号通路(HGF/c-Met)的影响.方法:构建靶向过表达MACC1基因的慢病毒载体LV-MACCl-GFP,感染膀胱癌T24细胞株,经过筛选,建立稳定过表达MACC1基因的膀胱癌T24细胞株.通过实时荧光定量PCR、蛋白质印迹法(western blotting)分别检测MACC1、HGF、c-Met基因mRNA与蛋白表达量,噻唑蓝(MTT)比色法、Transwell体外细胞侵袭实验分别研究稳定过表达MACC1基因对细胞增殖和迁移的影响.结果:与阴性对照组相比,实时荧光定量PCR与western blotting证实,慢病毒LV-MACCl-GFP组MACC1、HGF、c-Met mRNA与蛋白表达量皆显著升高,Transwell细胞侵袭实验显示LV-MACC1-GFP组细胞迁移能力显著增强(P<0.05).结论:慢病毒介导稳定过表达MACC1基因能使膀胱癌T24细胞株的增殖能力及侵袭能力增强,活化HGF/e-Met通路.

作者:刘良兵

来源:微创泌尿外科杂志 2015 年 4卷 6期

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作者:
刘良兵
来源:
微创泌尿外科杂志 2015 年 4卷 6期
标签:
膀胱癌 T24细胞 结肠癌转移相关基因1 过表达 bladder carcinoma T24 cells metastasis associated in colon cancer-1 overexpression
目的:观察结肠癌转移相关基因1 (MACC1)对膀胱癌细胞株T24增殖、侵袭能力以及对肝细胞生长因子信号通路(HGF/c-Met)的影响.方法:构建靶向过表达MACC1基因的慢病毒载体LV-MACCl-GFP,感染膀胱癌T24细胞株,经过筛选,建立稳定过表达MACC1基因的膀胱癌T24细胞株.通过实时荧光定量PCR、蛋白质印迹法(western blotting)分别检测MACC1、HGF、c-Met基因mRNA与蛋白表达量,噻唑蓝(MTT)比色法、Transwell体外细胞侵袭实验分别研究稳定过表达MACC1基因对细胞增殖和迁移的影响.结果:与阴性对照组相比,实时荧光定量PCR与western blotting证实,慢病毒LV-MACCl-GFP组MACC1、HGF、c-Met mRNA与蛋白表达量皆显著升高,Transwell细胞侵袭实验显示LV-MACC1-GFP组细胞迁移能力显著增强(P<0.05).结论:慢病毒介导稳定过表达MACC1基因能使膀胱癌T24细胞株的增殖能力及侵袭能力增强,活化HGF/e-Met通路.