[目的]研究在肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor-alpha,TNF-α)刺激下人肾小管上皮细胞(human kidneyproxiamal tubular cells-2,HK-2)Fractalkine的表达特点及其对人单核细胞(human acute monocytic leukemia cell line,THP-1)趋化作用的影响.[方法]利用MTT法观察TNF-α对HK-2细胞代谢和增殖活性的影响;采用RT-PCR、Real-Time PCR和Western印记法检测TNF-α刺激下HK-2细胞Fractalkine的mRNA和蛋白水平表达;应用免疫荧光细胞化学技术确定Fractalkine的亚细胞定位.应用Transwell装置观察TNF-α上调HK-2细胞Fractalkine表达和应用抗Fractalkine抗体状态下对THP-1细胞趋化作用的影响.[结果](1)正常培养的HK-2细胞仅表达少量的Fractalkine,40 ng/ml TNF-α干预24 h其表达量达到峰值.(2)倒置荧光显微镜下观察Fractalkine主要在细胞膜上.(3)TNF-α刺激后的HK-2细胞对于THP-1趋化作用增强,加入抗Fractalkine抗体后其趋化作用下降.[结论](1) TNF-α以时间剂量依赖方式上调人肾小管上皮细胞的Fractalkine的mRNA和蛋白表达.(2)Fractalkine主要表达于细胞膜表面.(3)TNF-α可通过上调Fractalkine表达增强HK-2细胞对于THP-1细胞的趋化作用.
作者:王珊珊;马萍;李辉;孙奕
来源:武警后勤学院学报(医学版) 2017 年 26卷 7期