目的: 探讨肿瘤坏死因子-α(TNF-α)对大鼠原代肾小管上皮细胞半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(caspase-3)激活与表达的调控以及核因子-κB(NF-κB)在其中的作用.方法: 体外分离与培养大鼠肾小管上皮细胞,以TNF-α(10 μg/L)按不同时间给予刺激, Western blotting检测caspase-3及其活化裂解片段cleaved caspase-3,以及I-κBα和磷酸化I-κBα(pI-κBα)蛋白水平.分别以TNF-α(10 μg/L)处理24 h、NF-κB特异性抑制剂Bay11-7082(5 μmol/L)处理25 h、Bay11-7082(5 μmol/L)预处理1 h后加入TNF-α(10 μg/L)刺激24 h,检测caspase-3及cleaved caspase-3的变化.结果: TNF-α刺激6至24 h,cleaved caspase-3与caspase-3的相对比值显著高于对照组;而caspase-3蛋白水平在TNF-α刺激后6 h无明显增高,12 h低于对照组,24 h回升;Bay11-7082处理组和Bay11-7082+TNF-α处理组的caspase-3蛋白表达与活化水平显著低于TNF-α处理组和对照组.结论: TNF-α促进大鼠原代肾小管上皮细胞caspase-3的激活与表达,这一过程与NF-κB的激活有关.
作者:刘珊英;李焱;潘秋辉;魏菁;范新兰;苏芳;林燕华;林天歆
来源:中国病理生理杂志 2010 年 26卷 1期