[目的]检测鲨鱼软骨制剂(shark cartilage preparation,SCP)对人肝癌SMMC-7721细胞的抑制效果及对凋亡调控蛋白Bcl-2和Caspase-3的影响.[方法]以不同浓度SCP加入体外培养的对人肝癌SMMC-7721细胞中,MTT法检测SCP对细胞生长抑制作用;Hoechst33342/PI双荧光染色法考察SCP对细胞凋亡的影响;采用流式细胞术比较不同处理后的对人肝癌SMMC-7721细胞凋亡水平;免疫细胞化学染色法检测不同组别细胞凋亡相关蛋白Bcl-2和Caspase-3蛋白的表达水平;Westernblotting检测Bcl-2蛋白和切割型Caspase-3(Cleaved-Caspase-3)蛋白的表达.[结果]SCP明显抑制对人肝癌SMMC-7721细胞生长,且抑制作用呈浓度-作用时间依赖性(P＜0.05),其24、48和72 h的IC50值分别为1.27、1.86和0.84 mg.1 mg/ml SCP处理细胞24 h,细胞出现核染色质凝集、凋亡小体等典型凋亡特征,随着处理时间延长,细胞凋亡比例明显增大并表现出时间依赖性(P＜0.05);免疫细胞化学、Western blotting检测显示SCP诱导细胞凋亡过程中Bcl-2蛋白表达减弱,Caspase-3蛋白表达明显增强.[结论]SCP可以抑制对人肝癌SMMC-7721细胞的增殖及诱导细胞凋亡,其诱导凋亡可能与下调Bcl-2蛋白表达并上调Caspase-3蛋白的表达有关.
作者：李伟；陈小义；刘英富；李威
来源：武警后勤学院学报（医学版） 2017 年 26卷 9期
