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目的 探讨转录因子SOX5在骨关节炎软骨细胞中的生物学功能.方法 分离培养人骨关节炎(osteoarthritis,OA)软骨细胞;运用脂质体2000转染法将siSOX5转染OA软骨细胞(OA-siSOX5),以转染NCsiRNA为阴性对照(OA-NCsiRNA);运用Real time PCR检测转染的OA软骨细胞中SOX5、白介素6(IL-6)、白介素1β(IL-1β)、II型胶原(COL2A1)及蛋白多糖(ACAN)mRNA的表达水平;酶联免疫法(ELISA)检测OA软骨细胞培养上清中IL-6和IL-1β 浓度;Western blot检测SOX5、基质金属蛋白酶1(MMP-1)和MMP-13蛋白表达水平;运用AnnexinV-FITC及流式细胞术检测细胞凋亡.结果 OA-siSOX5细胞中IL-6(0.72±0.05)和IL-1βmRNA(0.64±0.07)表达显著低于OA-NCsiRNA细胞(1.32±0.08、1.64±0.09)(P<0.05);COL2A1(1.27±0.08)和ACAN mRNA(2.38±0.17)显著高于OA-NCsiRNA细胞(0.58±0.04,1.25±0.10),(P<0.05);OA-siSOX5细胞中IL-6(175.2±14.5)pg/ml和IL-1β(102.6±20.3)pg/ml浓度显著低于OA-NCsiRNA细胞[(584.6±74.5)pg/ml和(268.4±25.3)pg/ml)](P<0.05);细胞凋亡率OA-siSOX5[(3.04±0.86)

作者:张磊;宁玉辉;李国顺;何涛;牟宗友;李明;郭金泉

来源:中国骨与关节杂志 2017 年 6卷 12期

知识库介绍

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作者:
张磊;宁玉辉;李国顺;何涛;牟宗友;李明;郭金泉
来源:
中国骨与关节杂志 2017 年 6卷 12期
标签:
骨关节炎 软骨细胞 SOX5 MMPs 细胞凋亡 Osteoarthritis Cartilage cells SOX5 MMPs Apoptosis
目的 探讨转录因子SOX5在骨关节炎软骨细胞中的生物学功能.方法 分离培养人骨关节炎(osteoarthritis,OA)软骨细胞;运用脂质体2000转染法将siSOX5转染OA软骨细胞(OA-siSOX5),以转染NCsiRNA为阴性对照(OA-NCsiRNA);运用Real time PCR检测转染的OA软骨细胞中SOX5、白介素6(IL-6)、白介素1β(IL-1β)、II型胶原(COL2A1)及蛋白多糖(ACAN)mRNA的表达水平;酶联免疫法(ELISA)检测OA软骨细胞培养上清中IL-6和IL-1β 浓度;Western blot检测SOX5、基质金属蛋白酶1(MMP-1)和MMP-13蛋白表达水平;运用AnnexinV-FITC及流式细胞术检测细胞凋亡.结果 OA-siSOX5细胞中IL-6(0.72±0.05)和IL-1βmRNA(0.64±0.07)表达显著低于OA-NCsiRNA细胞(1.32±0.08、1.64±0.09)(P<0.05);COL2A1(1.27±0.08)和ACAN mRNA(2.38±0.17)显著高于OA-NCsiRNA细胞(0.58±0.04,1.25±0.10),(P<0.05);OA-siSOX5细胞中IL-6(175.2±14.5)pg/ml和IL-1β(102.6±20.3)pg/ml浓度显著低于OA-NCsiRNA细胞[(584.6±74.5)pg/ml和(268.4±25.3)pg/ml)](P<0.05);细胞凋亡率OA-siSOX5[(3.04±0.86)