采用差异显示PCR技术(Differential Display-PCR, DD-PCR)寻找白色念珠菌的氟康唑耐药相关基因.体外用含氟康唑的酵母培养基(YEPD)诱导培养临床白色念珠菌氟康唑敏感株435(对咪康唑耐药),诱导80d后得到氟康唑耐药子代435-2(MIC=128μg/mL).DD-PCR比较435-2、435分别在含氟康唑、不含药的YEPD液基中的基因表达,找到3个明显差异片段,分别与数据库中白色念珠菌的醇脱氢酶基因ADH1、多药耐药基因CDR1及拓扑异构酶基因TOP2有高度同源性.半定量RT-PCR中证实了ADH1、CDR1在氟康唑耐药株中的差异表达;对已知氟康唑耐药基因MDR1作半定量RT-PCR时发现MDR1在氟康唑耐药株435-2中无表达,而在氟康唑敏感株435中有表达.结果表明,ADH1、CDR1基因的高表达与白色念珠菌氟康唑耐药性形成相关,ADH1可能是新的耐药基因;MDR1的表达可能在氟康唑敏感株或其它唑类耐药株中也存在.
作者：朱宇宁；吕时铭
来源：微生物学报 2004 年 44卷 4期
