从丝状真菌中筛选到一株产α-半乳糖苷酶的菌株F63,对该菌株进行了形态观察和18S rDNA序列分析,该菌株属于青霉属.采用硫酸铵沉淀、阴离子交换层析和分子筛层析等方法分离纯化了该菌株的一种α-半乳糖苷酶.经过聚丙烯酰胺凝胶电泳,此酶蛋白的分子量约为82kDa.该α-半乳糖苷酶反应的最适pH为5.0,最适温度为45℃.此α-半乳糖苷酶的热稳定性在40℃以下,pH稳定性为pH5.0-6.0.与已报道的α-半乳糖苷酶的活性都受到Ag+的强烈抑制不同的是,该α-半乳糖苷酶受Ag+的抑制作用不显著.以pNPG为底物的Km值为1.4mmol/L和Vmax=1.556mmol/L·min·mg-1.该酶可以有效降解蜜二糖、棉子糖和水苏糖,但不能降解末端含α-半乳糖苷键的多糖.通过利用质谱技术对纯化的α-半乳糖苷酶进行鉴定以及内肽的N端测序证明该蛋白为一种新的α-半乳糖苷酶.
作者:密士军;柏映国;孟昆;王亚茹;姚斌;史秀云;黄火清;张宇宏;石鹏君
来源:微生物学报 2007 年 47卷 1期