[目的]比较两种含不同个数基序乳酸乳球菌肽聚糖锚钩蛋白(protein anchor,PA)的结合活性.[方法]首先应用PCR技术分别扩增得到含有2个或3个自溶素基序(Lysin Motif,LysM)基因片段的PA2与PA3;然后应用pET-32a(+)质粒构建原核表达载体,将其转化大肠杆菌BL-21(DE3),进行诱导表达,获得目的蛋白;最后将经复性后的PA2、PA3融合蛋白与GEM(Gram-positive Enhancer Matrix,GEM)颗粒结合,经Western blot、透射电镜与SDS-PAGE进行结合鉴定与结合活性比较分析.[结果]融合蛋白PA2、PA3复性后都能与GEM结合,PA3与GEM颗粒的结合活性明显好于PA2.[结论]含有3个LysMs的PA对GEM的结合活性明显优于含有2个LysMs的PA.本研究可为进一步完善乳球菌外壳-蛋白锚钩展示系统提供理论基础.
作者：乔绪稳；李鹏成；郑其升；陈瑾；于晓明；侯立婷；吴楠；侯继波
来源：微生物学报 2015 年 55卷 2期
