目的：建立甲型 H1N1流感疫苗神经氨酸酶含量测定参考品。方法对甲型 H1N1流感疫苗原液进行还原电泳后，采用免疫印迹，糖蛋白染色，方法初步确定甲流 H1N1疫苗原液中神经氨酸酶 SDS-PAGE 条带位置，切取条带后通过 edman N 端测序法进行确认。采用 Lowry 法进行总蛋白定量，SDS-PAGE 密度扫描的方法确定神经氨酸酶比例，计算出疫苗原液中神经氨酸酶含量。结果确定甲流疫苗原液中神经氨酸酶在 SDS-PAGE 中相对分子质量约71000，对多批次疫苗原液进行测定后，选取神经氨酸酶含量较高的批次进行测定，总蛋白质量浓度为1046．00μg／mL，神经氨酸酶质量分数11．78％。二者相乘得出该批次疫苗原液神经氨酸酶含量为123．22μg／mL。结论研究成功建立了甲型 H1N1流感疫苗神经氨酸酶含量测定参考品，其他毒株生产的流感疫苗也可以参考该方法建立 NA 含量测定参考品。
作者：徐康维；陶磊；邵铭；刘书珍；李长贵
来源：微生物学免疫学进展 2015 年 2期
