目的:应用whaF基因测序方法,对20型肺炎链球菌进行血清型鉴定。方法采用血清凝集法和用20型肺炎链球菌型特异性基因( wciL基因)合成的引物进行PCR扩增,对中国医学细菌保藏管理中心所保藏的20型肺炎链球菌进行血清学鉴定;根据GenBank上发表的whaF基因设计合成引物,PCR扩增whaF基因,利用测序获得基因序列,分析whaF基因多态性。结果7株20型肺炎链球菌菌株均能与20型血清产生血清凝集反应,wciL基因PCR扩增产物,可见与预期相符大小500 bp的特异性条带。 whaF基因PCR扩增产物,除20-3外,其余6株菌均可见1000 bp大小与预期相符的PCR扩增产物。 whaF基因测序和分析显示:20-2、20-4、20-5、20-7与20B亚型( GenBank acces-sion No.:CR931679和JQ653093)的 whaF 基因序列相同;20-6与20A 亚型(GenBank accession No.:JQ653094)的whaF基因序列相同;20-1与CR931679和JQ653093相比,在898有点突变( A→C)。20-3的whaF基因比20A亚型和20B亚型的whaF基因均少了约600 bp。结论20-6为20A亚型肺炎链球菌,20-2、20-4、20-5、20-7均为20B亚型肺炎链球菌。
作者:陈琼;李康;徐潇;黄洋;李红;王春娥;陈翠萍;叶强
来源:微生物学免疫学进展 2016 年 44卷 2期