对大肠杆菌芳香族氨基酸合成途径进行代谢流改造,以实现高效的生物制备莽草酸.以磷酸烯醇式丙酮酸-糖磷酸转移酶系统(PTS系统)敲除菌DH5αΔptsHIcrr(DHP)为基础,特异性敲除aroL,ydiB基因并转入受阿拉伯糖诱导表达的T7-RNA聚合酶基因,最终构建一系列产莽草酸宿主菌.再将aroE、aroB、tktA、glk、aroF<'fbr>组成的系列基因串联起来置于质粒上,在T7启动子控制下表达,经摇瓶培养检测得知,不同重组菌产莽草酸能力与对照相比均有明显提高,其中DHPYA-T7/pAOC-TGEFB菌株产量最高,可达到392 mg/L.为进一步构建高表达莽草酸工程菌奠定基础.
作者:邹永康;周军智;孙旭;蔡亚非;戴红梅;李树龙;周长林;方宏清
来源:微生物学通报 2011 年 38卷 8期