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[目的]探究聚球藻7002嗜铁素的检测和分离方法,为深入研究海洋嗜铁素提供科学依据.[方法]在缺铁MediumA中培养聚球藻7002,利用双层平板法、混合平板法和传统铬天青S (CAS)平板法定性检测嗜铁素,用CAS蓝色液体检测液定量检测嗜铁素.采用大孔树脂XAD-2和固定化金属离子亲和层析(IMAC)对嗜铁素进行分离,IMAC采用降低pH和竞争性洗脱两种洗脱方式.[结果]混合平板定性检测法更快速、高效、便捷.缺铁培养的聚球藻7002发酵液中,嗜铁素的相对含量高达93.50%.大孔树脂分离,上样液pH调为2.0时,嗜铁素吸附充分,分离效果较好.试验发现,分离得到的聚球藻7002嗜铁素在254 nm紫外下具有明显的荧光特性.[结论]试验得到了聚球藻7002嗜铁素定性检测和分离的有效方法.

作者:高风正;赵元晖;赵剑光;曾名湧

来源:微生物学通报 2015 年 42卷 2期

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作者:
高风正;赵元晖;赵剑光;曾名湧
来源:
微生物学通报 2015 年 42卷 2期
标签:
聚球藻7002 铬天青S 大孔树脂XAD-2 固定化金属离子亲和层析 Synechococcus sp.PCC 7002 Chromazurol S Amberlite XAD-2 resin Immobilized metal-chelating affinity chromatography
[目的]探究聚球藻7002嗜铁素的检测和分离方法,为深入研究海洋嗜铁素提供科学依据.[方法]在缺铁MediumA中培养聚球藻7002,利用双层平板法、混合平板法和传统铬天青S (CAS)平板法定性检测嗜铁素,用CAS蓝色液体检测液定量检测嗜铁素.采用大孔树脂XAD-2和固定化金属离子亲和层析(IMAC)对嗜铁素进行分离,IMAC采用降低pH和竞争性洗脱两种洗脱方式.[结果]混合平板定性检测法更快速、高效、便捷.缺铁培养的聚球藻7002发酵液中,嗜铁素的相对含量高达93.50%.大孔树脂分离,上样液pH调为2.0时,嗜铁素吸附充分,分离效果较好.试验发现,分离得到的聚球藻7002嗜铁素在254 nm紫外下具有明显的荧光特性.[结论]试验得到了聚球藻7002嗜铁素定性检测和分离的有效方法.