[背景]血栓性疾病发病率逐年递增,发病人群呈现低龄化趋势,严重地影响着人们的身心健康.因此研发高效、安全、特异性强的溶栓药物具有重要的意义,是血栓性疾病预防与治疗研究领域的热点.[目的]对冬虫夏草菌丝固态培养过程中产生的纤溶酶进行分离纯化,并对纯化的纤溶酶进行酶学性质分析.[方法]通过硫酸铵盐析、阳离子交换色谱和Superdex 75凝胶过滤色谱分离纯化虫草纤溶酶.采用Bradford法测定样品中总蛋白质浓度,纤维蛋白平板法测定纤溶酶活性,Native-PAGE检测纯度,SDS-PAGE测定相对分子量.[结果]在固态培养中冬虫夏草菌丝可以产生至少两种纤溶酶,分别命名为OSP-1和OSP-2.纯化后OSP-1比活力达到4 186.25 U/mg,纯化倍数为41.69倍.OSP-1由两个亚基构成,相对分子量分别为27.60 kD和23.83 kD,是一种丝氨蛋白酶.酶学性质分析表明,该酶最适作用温度为40℃,最适pH为4.0.Cu2+可促进OSP-1酶活,而Zn2+会抑制酶活.除了具有较高的纤溶酶活性,OSP-1还可发挥激活纤维蛋白酶原的作用.在水解纤维蛋白原的过程中,该酶可依次降解γ、Aα、Bβ链.[结论]研究发现的OSP-1具有开发成新型溶栓药物的潜力.
作者：臧琬婷；梅余霞；梁运祥
来源：微生物学通报 2020 年 47卷 2期
