[背景]Burkholderia sp.SJ98利用对硝基酚和2-氯-4-硝基酚为唯一碳源和能源进行生长,通过异源表达嗜盐古菌Haloferax sp.D1227中的超氧化物歧化酶SodA,使菌株SJ98在500 mmol/LNaC1条件下仍具有降解对硝基酚的能力.然而该重组细菌在普通和高盐条件下其降解基因的转录和降解酶比活力的高低,以及该菌在高盐条件下是否还能降解对硝基酚衍生物尚未知晓.[目的]研究Burkholderia sp.SJ98的耐盐上限,观察含有sodA的细菌SJ98在普通和高盐条件下降解对硝基酚和2-氯-4-硝基酚的能力,检测重组菌中pnpA基因的转录和硝基酚单加氧酶的活力.[方法]在添加葡萄糖、对硝基酚或2-氯-4-硝基酚的无机盐培养基(分别含400-800 mmol/L NaCl)或M9培养基(含0和500 mmol/L NaCl)中培养细菌SJ98及其重组菌.通过紫外分光光度计和高效液相色谱法检测菌株生长和底物降解.通过实时荧光定量PCR分别以两种硝基酚为诱导物,检测未添加和添加500 mmol/L NaC1时,硝基酚单加氧酶编码基因pnpA的转录量变化.利用紫外分光光度计分别以两种硝基酚为底物,检测在添加500 mmol/L NaCl时,重组菌和空载体菌的粗酶液中硝基酚单加氧酶对两种底物的活力变化.[结果]野生型菌株SJ98以葡萄糖为碳源生长的NaC1耐受浓度是600 mmol/L.未添加NaCl时,重组菌SJ98[pCM-pn
作者：刘娟；翁国永；冯莉；许楹；周宁一
来源：微生物学通报 2020 年 47卷 8期
