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[背景]蜜环菌属(Armillaria)是一类营腐生或寄生生活的药食两用型真菌,研究其功能基因表达具有重要意义.[目的]筛选并获得蜜环菌(Armillaria mellea)最稳定的内参基因.[方法]以蜜环菌(A.mellea) 541为研究对象,以马铃薯琼脂糖培养基培养的菌丝和菌索为对照组,以添加还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(nicotinamide adenine dinucleotide phosphate,NADPH)氧化酶抑制剂氯化二亚苯基碘鎓(diphenyleneiodonium chloride,DPI)培养的菌丝和菌索为抑制剂组,以添加木屑培养的菌丝和菌索为诱导剂组,利用RT-qPCR技术和BestKeeper程序系统评估候选内参基因ACT-1、α-TUB、β-TUB l、γ-TUB、UBQ、EF-1γ、 18S rRNA biogenesis protein基因(18S rRNA BP)和GAPDH的表达量稳定性.[结果]内参基因EF-lγ在对照组、DPI抑制剂组和木屑诱导剂组中的表达量稳定性最好.[结论]EF-lγ为蜜环菌(A.mellea)的最佳内参基因,为蜜环菌属真菌功能基因表达研究提供了参考.

作者:李兵;刘柳;单婷婷;邢咏梅;郭顺星

来源:微生物学通报 2022 年 49卷 2期

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作者:
李兵;刘柳;单婷婷;邢咏梅;郭顺星
来源:
微生物学通报 2022 年 49卷 2期
标签:
蜜环菌;菌丝;菌索;内参基因;实时荧光定量PCR
[背景]蜜环菌属(Armillaria)是一类营腐生或寄生生活的药食两用型真菌,研究其功能基因表达具有重要意义.[目的]筛选并获得蜜环菌(Armillaria mellea)最稳定的内参基因.[方法]以蜜环菌(A.mellea) 541为研究对象,以马铃薯琼脂糖培养基培养的菌丝和菌索为对照组,以添加还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(nicotinamide adenine dinucleotide phosphate,NADPH)氧化酶抑制剂氯化二亚苯基碘鎓(diphenyleneiodonium chloride,DPI)培养的菌丝和菌索为抑制剂组,以添加木屑培养的菌丝和菌索为诱导剂组,利用RT-qPCR技术和BestKeeper程序系统评估候选内参基因ACT-1、α-TUB、β-TUB l、γ-TUB、UBQ、EF-1γ、 18S rRNA biogenesis protein基因(18S rRNA BP)和GAPDH的表达量稳定性.[结果]内参基因EF-lγ在对照组、DPI抑制剂组和木屑诱导剂组中的表达量稳定性最好.[结论]EF-lγ为蜜环菌(A.mellea)的最佳内参基因,为蜜环菌属真菌功能基因表达研究提供了参考.