从实验室分离保存的1株产果胶酶的菌株(BTC105)中克隆果胶裂解酶基因(PelC)完整开放阅读框,通过载体构建,将目的基因连接到表达载体pET28a上,转化大肠埃希菌BL21(DE3)进行融合表达,在LB(Luria-Bertani)中进行摇瓶发酵,1 mmol/L IPTG(异丙基-β-D-硫代半乳糖苷)诱导.结果表明,构建了表达载体pET28a-pelC,果胶裂解酶主要在胞内表达,酶活最适pH为5.4,最适温度为50℃,Ca~(2+)对酶活促进作用最为明显,Cu~(2+)完全抑制了酶的活性.
作者:邓伟科;郭安平;刘恩平;王炎松;郭运玲;孔华;阳辛凤;贺立卡
来源:微生物学杂志 2009 年 29卷 5期