以转抗菌肽BD基因辣椒为材料,研究建立转基因食品中外源目的蛋白的检测技术,并建立对其忠实表达状况和安全性进行评价的模式.以柞蚕蛹免疫血淋巴作为标准,对照检测转抗菌肽辣椒目的蛋白表达的忠实性,采用针对转基因食品技术特点而预先设计的技术路线进行分析检测.研究和检测步骤为:目的蛋白经粗提,达到初步纯化.再用两次CM-Sepharose-FF离子交换柱层析进行中度纯化.纯化产物通过测定抗菌活性、电泳及生物自显影、质谱进行鉴定.系统的检测结果表明,以抗菌肽目的基因构建的重组体在导入辣椒后,所表达的外源目的蛋白与对照标准蛋白的理化性质、抗菌活性、分子量一致,说明在该转基因辣椒中抗菌肽目的基因的表达是忠实的,与期望值相符.本研究建立了目的蛋白抗菌肽D的分离纯化及鉴定技术,建立了转基因辣椒外源目的蛋白的鉴定方法.方法简便快捷可行.
作者：刘建军；邓平建；房师松；赵锦；钟杨生；廖富苹
来源：卫生研究 2003 年 32卷 2期
