目的建立一种快速、敏感的方法,用于检测食品中O1群(EVC)、O139群霍乱弧茵和副溶血性弧茵.方法针对霍乱弧茵O139特异基因(T139)、肠毒素A亚单位基因(ctxA)、毒力协调A亚单位基因(tcpA),副溶血性弧菌热稳定性直接溶血素基因(tdh)为靶序列,建立MPCR检测方法,相应扩增片段依次为417bp、564bp、471bp和202bp.结果用该方法对EVC、O139VC、副溶血性弧菌的标准菌株和野生株,扩增片段出现极好的特异性,而35株非O1非O139群霍乱弧菌、沙门氏菌等未见扩增带.人工污染的罗非鱼、牡蛎、鱼肠和鳃混合物的检出限EVC为22 cfu/g、O139为5 0cfu/g、副溶血性弧茵为65cfu/g,整个实验过程8~10h完成.结论实验结果表明MPCR是敏感、省时、省力的检测方法.
作者:许龙岩;周宏斌;高东微;阳静;谢钧宪
来源:卫生研究 2005 年 34卷 1期