目的为研究肺癌发生机制中DNA氧化损伤修复基因HOGG1的可能作用,利用携带有HOGG1特异性锤头状核酶基因的载体与肺腺癌A549细胞株,建立HOGG1低表达细胞株并观察其生物学效应.方法 HOGG1特异性锤头状核酶真核表达载体[pcDNA3.1(+)-RZ]经脂质体介导转染A549细胞;G418筛选;Neo基因的RT-PCR法鉴定阳性克隆细胞;RT-PCR半定量检测核酶对HOGG1基因的抑制效应.同时比较转染细胞与正常A549细胞的生长情况、细胞周期、软琼脂克隆形成率以及超氧化物歧化酶(SOD)的活力. 结果转染后G418成功筛选出了阳性转化克隆,经传代形成稳定细胞株.核酶可持续抑制A549细胞HOGG1基因的表达,RT-PCR结果显示转染细胞HOGG1 mRNA的表达比正常A549细胞低61.5
作者：张遵真；张勤；李娜；衡正昌
来源：卫生研究 2005 年 34卷 6期
