目的建立并鉴定DNA错配修复酶hMSH2缺陷细胞株,用于研究hMSH2基因的作用机制及其缺陷与肿瘤发生的关系.方法运用基因工程的方法获得hMSH2 cDNA片段,并反向克隆到绿色荧光蛋白真核表达载体pEGFP-C1上,随后将构建好的hMSH2反义RNA绿色荧光蛋白真核表达载体转染入人胚肺成纤维细胞(HLF),使之在HLF中表达,用蛋白免疫印迹法鉴定转染细胞中hMSH2基因的表达水平.结果构建了hMSH2反义RNA绿色荧光蛋白真核表达载体,并在真核细胞成功表达;hMSH2酶缺陷细胞株hMSH2基因的蛋白表达水平下降了44
作者:何云;庄志雄;扬杏芬;郑树森;杜柳涛
来源:中国公共卫生 2003 年 19卷 8期