目的 以动脉粥样硬化(As)病灶中的主要细胞类型-血管平滑肌细胞为模型,对比研究同型半胱氨酸(Hcy)和半胱氨酸(Cys)在致As发病效应上的异同,以期为Hey作为As独立危验因子的分子机制提供有比较的证据.方法 体外培养人脐静脉血管平滑肌细胞(VSMCs),用不同浓度的Hcy和Cvs作用于细胞24h后:(1)用分光光度比色法测定细胞中SOD和MDA的含量;(2)流式细胞术检测细胞凋亡率,半定量RT-PCR方法检测caapases-3 mRNA的表达;(3)MTT法测定细胞的增殖率;(4)用1000μmol/L Hcy和Cvs分别作用VSMCs 24、48和72h后,MS-PCR法检测ERa启动子区甲基化的状态,半定量RT-PCR法检测ERa mRNA的表达.结果 (1)Hcy可导致细胞内MDA、SOD呈剂量依赖性增加,Cys使MDA、SOD增加的效应远弱于Hcv(P<0.01).(2)流式细胞术、cmpasew3 mRNA的表达和MTT试验的结果显示,Hcy、Cys对血管平滑肌细胞凋亡率和增殖丰的影响差异不太明显.(3)Hcy显著增加ERa基因启动区的甲基化修饰,并使ERn mRNA的表达进行性减少. Cys不影响ERa启动子区的甲基化状态,对ERa mRNA表达的影响也远小于Hcv.结论 氧化应激对DNA甲基化修饰的影响可能在Hcy致As发病的机制中占据着重要的地位,这也可能是Hcy和Cys在As发病机制中作用不同的重要原因.
作者：苏娟；王生兰；黄玉珊；姜怡邓；王树人
来源：卫生研究 2009 年 38卷 1期
