目的通过基因克隆技术获得饰胶蛋白基因cDNA克隆并表达。为研究饰胶蛋白的生物学功能及应用打基础。方法应用PCR技术从T细胞cDNA文库获得饰胶蛋白全长基因cDNA片段,并克隆到pUC19载体中,采用Sanger双脱氧末端终止法测定全部cDNA序列,将测序正确的饰胶蛋白cDNA序列插入pGEX-4T-1表达载体中,经BamHI和EcoRI双酶切后1.2%凝胶电泳鉴定,IPTG诱导表达产物经SDS-PAGE分析。结果克隆的饰胶蛋白cDNA序列与GenBank中AF138300记载的序列完全一致,所表达的融合蛋白质分子量与理论计算值(65.6KD)也一致并为可溶性蛋白。结论本研究成功地克隆了饰胶蛋白基因和表达了GST-Decorin融合蛋白。
作者:曹茂开;赵文明;侯云德
来源:西安医科大学学报 2000 年 21卷 6期