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目的以谷胱甘肽-S-转硫酶(GST)为模型,探讨有产物抑制时用积分法分析酶反应过程测定底物量的可靠性.方法从猪肝制备GST.1-氯-2,4-二硝基苯(CDNB)终浓度为1.0 mmol/L,监测GST催化还原型谷胱甘肽(GSH)与CDNB结合产物在340 nm吸收变化.用积分法预测反应终点的产物吸收.结果优化产物抑制常数可使此积分法所得反应终点产物吸收对剩余底物变化不敏感.此积分法测定GSH对常见干扰有抗性.此法测定大鼠肝匀浆中外加GSH回收率大于98

作者:赵利娜;陶佳;赵运胜;廖飞

来源:西安交通大学学报(医学版) 2006 年 27卷 3期

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赵利娜;陶佳;赵运胜;廖飞
来源:
西安交通大学学报(医学版) 2006 年 27卷 3期
标签:
积分法 动力学酶法分析 还原型谷胱甘肽 谷胱甘肽-S-转硫酶 1-氯-2,4-二硝基苯
目的以谷胱甘肽-S-转硫酶(GST)为模型,探讨有产物抑制时用积分法分析酶反应过程测定底物量的可靠性.方法从猪肝制备GST.1-氯-2,4-二硝基苯(CDNB)终浓度为1.0 mmol/L,监测GST催化还原型谷胱甘肽(GSH)与CDNB结合产物在340 nm吸收变化.用积分法预测反应终点的产物吸收.结果优化产物抑制常数可使此积分法所得反应终点产物吸收对剩余底物变化不敏感.此积分法测定GSH对常见干扰有抗性.此法测定大鼠肝匀浆中外加GSH回收率大于98