目的 探讨Wnt-11体外诱导骨髓间充质干细胞(BMMSCs)分化为心肌样细胞的最适浓度.方法 采用全骨髓贴壁法分离培养SD大鼠BMMSCs,取第2代BMMSCs培养48 h后进行定向诱导,根据Wnt-11终浓度的不同分为A组(100 ng/mL),B组(200 ng/mL),C组(400 ng/mL)和D组(空白对照组),诱导72 h后更换为完全培养液继续培养4周,D组仅用完全培养液培养.倒置相差显微镜下观察培养细胞的形态学变化.运用流式细胞仪检测技术对BMMSCs表面联合标记物进行鉴定.各组细胞培养至第4周时,运用免疫细胞化学染色技术检测结蛋白(Desmin)、间隙连接蛋白43(Connexin43)及心肌肌钙蛋白I(cTnI)的表达情况.运用透射电镜观察分化细胞的超微结构变化.实时荧光定量多聚核苷酸链式反应(real-time quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR)检测各组细胞在诱导后培养第1、2、4周时心肌早期转录因子GATA-4、Nkx2.5及α-MHC的表达.结果 ①原代BMMSCs于第2周形成集落,多呈梭形、星形,少数形状不规则.传代后细胞体积变大,诱导后细胞多为长梭形,呈一致性生长.②流式细胞仪检测技术对BMMSCs表面联合标记物的鉴定结果显示CD29、CD45、CD90的阳性表达率分别为97.9
作者：刘源；王海萍；吕洋；王浩宇；霍艳丽
来源：西安交通大学学报（医学版） 2017 年 38卷 2期
